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PCR污染被揭露,为XMRV的争论火上浇油

异养性小鼠白血病相关病毒(XMRV)与慢性疲劳综合征(CFS)、一种病因不明的衰弱状态以及前列腺癌有关。这些关联引发了激烈的争论,随后的研究要么支持要么质疑这种关联。

然而,大多数研究,无论是支持还是否定XMRV与这两种疾病之间的联系,都严重依赖PCR检测提供的证据。因此,当逆转录病毒学在2010年12月发表了四篇研究文章,揭示了与XMRV PCR分析相关的潜在污染问题时,极大地影响了先前研究的有效性。所有四项研究都表明,老鼠的遗传物质会污染实验,导致假阳性结果。

Robinson等通过对437份人体组织样本的PCR检测表明,虽然在前列腺癌患者中检测到了XMRV基因序列,但也检测到了其他小鼠基因序列。奥克斯和他的同事证实,来自CFS患者的XMRV阳性血液样本对小鼠线粒体DNA检测呈阳性。此外,两项研究都表明,健康患者的样本对XMRV和小鼠线粒体DNA均呈阳性。据认为,这些研究中使用的血液和组织样本在PCR分析之前已被小鼠DNA污染。

正如Sato等人报告的,在PCR过程中也可能发生污染,他们在实际的PCR试剂中,即从Invitrogen公司提供的RT-PCR试剂盒中检测到MLV-编码核酸。这种污染会导致对XMRV的错误检测。因此,在他们的结论中,作者敦促在研究中使用PCR试剂盒之前谨慎评估,以消除假阳性结果的风险。

XMRV的PCR检测目标是24-nt gag-leader的缺失,但是Hue等人在他们的研究文章中指出,这种缺失并不是XMRV独有的,针对这种缺失的引物扩增了在实验室中使用的12种不同鼠株和5种肿瘤细胞系中发现的MLV序列。顺化等人从包括系统发育分析在内的多管齐下的调查中得出结论,XMRV不是一种真正的人类病原体。

这些最近发表的文章对以前的研究结果提出了严重的质疑,这些研究结果声称证明了XMRV和CFS或前列腺癌之间存在联系,并规定在未来的调查中要考虑和考虑这些污染源,以使新发现可信。